DAOS,中文名称N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺钠盐,成品为白色或浅蓝色粉末,CAS号为83777-30-4,分子式是C13H20NNaO6S,分子量341.36,DAOS是新型Trinder’s试剂的一种,具有高水溶性,反应稳定,PH适应范围广泛,作为一种好的显色试剂被广泛的应用于诊断检测和生化实验。其检测原理为:在过氧化氢和过氧化物酶的存在下,新型 Trinder’s 试剂在与 4-氨基安替比林(4-AA)或 3-甲基苯并噻唑砜腙(MBTH)的氧化偶合反应过程中,形成非常稳定的紫色或蓝色染料,再经分光光度法测出底物浓度。
一、DAOS在血糖测定实验中的优势:
血液中葡萄糖的测定是临床医学重要的检测项目。目前常用的检测方法是葡萄糖氧化酶偶联过氧化物酶法,此法是利用GOD催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并产生H2O2,H2O2在POD催化下氧化无色的还原型色原生成有色的氧化型色素,然后根据氧化型色素的颜色求出样品中葡萄糖的含量。此法的初始反应是特异性的,而指示反应却是非特异性的,随着指示反应中还原型色原的不同,该法的检测性能也随之改变,常用的还原型色原还有领联茴香胺(因怀疑有致癌性,现已很少使用),改进的Trinder’s试剂DAOS与4-氨基安替比林(AAP)偶联作为还原型色原测定葡萄糖含量,DAOS与AAP氧化缩合后形成的氧化型色素的吸收波长在592nm,在此波长下,血液中胆红素等物质没有干扰吸收,可以减小胆红素和其他干扰物质对血糖检测的吸收干扰。所以本法测血糖含量不需把血液分离为血清,比临床上广泛使用的酶法分析中以苯酚为还原型色原的测定方法简便、准确。本法测定葡萄糖的线型范围在1~20mmol/L;回收率为96.3%~97.7%。
二、仪器与试剂:
紫外可见分光光度计,葡萄糖氧化酶,过氧化物酶,DAOS,AAP,无水葡萄糖,柠檬酸与二水合柠檬酸三钠,甘油,牛血清白蛋白,血糖检测试剂盒,GOD和POD用PH=6的缓冲溶液配制,其余试剂均用蒸馏水配制。
三、实验方法:
在1cm比色皿中,依次加入GOD0.5ml(25.6U),POD0.5ml(11.5U),
DAOS0.1ml(1.7mmol/L),AAP0.1ml(2.9mmol/L),蒸馏水0.8ml,然后加入葡萄糖溶液40ul(8.3mmol/L),搅拌均匀后以蒸馏水做参比,测定吸收谱。
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