​Tris（77-86-1）结构在Bis-Tris中的作用分析

Bis-Tris, Tricine，TES，TAPS，均为生物化学实验和分子生物学实验中经常使用的缓冲剂，它们的分子结构中都含有Tris的分子结构。那么在使用中这几种缓冲剂与Tris有哪些差异呢？它们各自之间又有哪些相同或不同之处呢？这里对这几种缓冲剂进行总结。

Tris

三羟甲基氨基甲烷（Tris），25°C下的pKa为8.06，缓冲范围7.0~9.0。其常用实验如下：

（1）常用于凝胶电泳缓冲液中，例如TAE或TBE；

（2）常用于制备Laemmli缓冲液；

（3）常与甘氨酸和SDS一起制备运行缓冲液和上样缓冲液；

（4）可以用作阴离子交换层析中的结合缓冲液和洗脱液；

（5）被用作RNA杂交和DNA裂解的缓冲液。

在Tris的使用中，需要注意：Tris缓冲液的pH值受温度和浓度影响很大，因此在配制过程中要考虑使用环境；Tris的伯胺基在一定程度上与各种分子反应，包括RNA酶抑制ji，醛，常见金属如Cr3+，Fe3+，Ni2+，Co2+和Cu2+等，酶，以及DNA，此外，Tris不适用于二喹啉甲酸（BCA）测定。

Bis-Tris

Bis-Tris，双(2-羟乙基)氨基(三羟甲基)甲烷，两性离子缓冲剂，25°C下pKa为6.46，pH缓冲范围为5.8~7.2。其应用领域如下：

（1）作为各种类型电泳的样品缓冲液，凝胶缓冲液和运行缓冲液；

（2）作为阴离子交换色谱法中的缓冲液；

（3）被用于卤代烷烃脱卤酶结晶过程的X射线晶体学研究；

（4）低导电性和高灵敏度，是NMR光谱的有效缓冲液；

（5）与人肝脏型脂肪酸结合蛋白（FAB）相互作用并影响蛋白质动力学。

Bis-Tris能与Cu2+和Pb2+形成强复合物，与许多常见金属形成弱复合物，因此在含有金属离子的溶液中使用时，应考虑其络合常数。此外，在有压力变化的体系中，可使用Bis-Tris缓冲溶液。Bis-Tris可替代高毒性二甲基胂酸盐缓冲剂，但同样不适用于二喹啉甲酸（BCA）测定。

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